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会议内容
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CRISPR/Cas9基因靶向修饰技术

 

会议日程安排
第一天上午9:00-12:00
第一讲、基因组靶向修饰技术简介
1、基因功能研究的分子遗传学技术简介       2、基于NHEJ修复的基因敲除和基于HR修复的基因敲入 
3、ZFN和TALEN技术         4、CRISPR/Cas9技术    

第二讲、CRISPR的设计
1、目标基因结构及功能的生物信息学分析   2、CRISPR的设计原则    3、CRISPR的在线设计(可自带可无线上网之笔记本电脑或手机) 4、靶向编辑基因的基因型确认及CRISPR的再设计


第一天下午13:00-17:00
第三讲、基因组编辑工具的制备及向细胞内的递送策略
1、基因组编辑工具之DNA表达元件的制备与递送策略   2、基因组编辑工具转录产物制备及递送策略   3、基因编辑工具RNP的制备与递送策略

实验(或技术细节答疑)一: CRISPR/Cas9 基因组编辑工具All-in-One表达质粒的构建(1)
1、CRISPR模板引物的准备     2、CRISPR模板的制备   3、退火CRISPR模板与线性化CRISPR/Cas9 All-in-One载体的重组        4、大肠杆菌的转化               5、携带基因组编辑工具的转化子的涂板培养

第二天上午9:00-12:00
第四讲、sgRNA活性验证
1、体外法     2、体内法    2.1 插入缺失(Indel)突变检测的基本策略  2.2 基于胚胎反应器的活性验证方法  2.3 基于细胞系的活性验证方法

实验(或技术细节答疑)二:CRISPR/Cas9 基因组编辑工具All-in-One表达质粒的构建(2)
基因组编辑工具之CRISPR/Cas9 All-in-One重组子的快速验证法(PCR法) 

实验(或技术细节答疑)三:基因组编辑子等位基因的基因型鉴定
1、基因组DNA模板制备     2、目标基因的基因组DNA片段的PCR扩增

第二天下午13:00-17:00
第五讲、利用CRISPR技术创建基因组编辑人及动物细胞系
1、创建基因组编辑细胞系的基本过程    2、基因敲入的供体DNA的设计原则及基因敲入供体设计实例
3、表达CRISPR的All-in-One表达质粒(和供体)导入细胞系的方法   4、阳性细胞克隆筛选    5、靶向突变的基因型鉴定及基因组编辑细胞系的建立  6、敲入基因和敲除基因(无效等位基因)的确认   7、建立基因组编辑细胞系的优选策略

第六讲、利用CRISPR技术创建基因敲除或敲入动物
1、创建基因组编辑动物突变体的基本过程    2、sgRNA/Cas9 mRNA(和供体)共显微注射入受精卵中建立初建者  3、初建者体细胞携带靶向突变等位基因的确认    4、基因敲除/敲入动物(F1)的鉴定  5、基因敲除/敲入动物品系(F2)的建立  6、敲除/敲入基因的确认   7、建立基因敲除或敲入突变体动物的优选策略

第七讲、利用CRISPR技术创建基因敲除或敲入植物
1、创建基因组编辑植物突变体的基本过程  2、双元载体的转染 3、基因敲除/敲入植物(F1)鉴定

实验(或技术细节答疑)四:实验结果的点评与讨论
1、CRISPR/Cas9 All-in-One重组子的PCR产物电泳检测结果点评  2、基因组编辑等位基因的基因型鉴定电泳检测结果的点评  3、测序是验证基因组编辑结果的金标准 

第三天上午9:00-12:00(12:00以后课程结束)
第八讲、基因组编辑技术的脱靶问题
1、脱靶的产生原因    2、脱靶检测   3、解决脱靶问题的方法  4、脱靶问题对不同领域研究者的意义

第九讲、利用CRISPRi或CRISPRa技术调控基因在细胞中的表达
1、dCas9的特征简介   2、运用CRISPR技术调控基因在细胞中表达的基本实验过程   3、CRISPR技术的转录抑制  4、CRISPR技术的转录活化

第十讲、CRISPR技术的伦理学问题
1、 新型基因组编辑技术的发展(碱基编辑)   2、基因组编辑技术的应用  3、基因组编辑技术对未来社会的革命性的影响   4、基因组编辑技术的伦理学问题

【主办单位】 上海玮瑜生物科技有限公司
【会议时间地点】 2017年915-17   南京市 江北新区 浦口经济开发区低碳谷
【住  宿】
为了便于接送、统一指定南京龙华大酒店,住宿自理
标准间(含早)280元/人  合住140元/人 南京浦口区江浦街道龙华路2号近南京工业大学浦口校区
【会议收费标准】
 3300元/人 (不含住宿费)  授课期间发放纸质邀请函(盖章) 按交费先后顺序确定名额及座位,注册费包含教材、午餐等费用。 
【付款方式】
1,转账或支付宝:
A:银行转账
账户名称:上海服淡信息科技有限公司     账 户 号:31578103002581719
开 户 行:上海银行桃浦支行
B:支付宝转账
收款人:wybiot@163.com     支付宝户名:上海玮瑜生物科技有限公司
2,现场刷卡或现金(支持刷公务卡)
联系人:谢老师  13611825136   指定报名邮箱:wybiot@126.com

报名方式

1,报名请将您的姓名手机号码发送到wybiot@126.com   备注报名班级  如两天没收到回复 请您致电13611825136

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